校园翼迅自助服务网站进不去怎么办

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本文目录

  1. 极冷的冷知识有哪些
  2. 空间站冷吗
  3. 在PCR扩增实验中应注意什么

极冷的冷知识有哪些

极冷的冷知识包括:在潜入水中几分钟后,人体会快速失去体温,导致瞬间冻僵,而死亡并非是因体温过低,而是由于严重心律失常导致的;

北极熊在长时间未吃食物时,可以进入一种“低动能状态”,可以在缺食状态下生存长达数月;

南极洲的冰盖中蕴藏着数以万计的维多利亚时代的尸体,因为寒冷的环境使得腐烂过程极为缓慢;地球上曾有一个冷冻时代,称为雪球地球时期,地球表面几乎完全被冰雪覆盖,长达数百万年。这些极冷的冷知识揭示了极端环境下生命的适应和人类的脆弱。

空间站冷吗

据外媒报道,随着美国宇航局冷原子实验室(CAL)开始生产超冷原子,国际空间站(ISS)将成为太空中最冷的地方。

这些原子被称为玻色-爱因斯坦凝聚体,作为微重力实验的一部分,将能“制造”比太空真空环境温度低100亿倍的温度,以研究量子力学和物质的基本性质。

在PCR扩增实验中应注意什么

1.引物的质量是保证PCR特异性的关键,引物过长或过短均会使特异性降低,以18~30bp为宜;引物中C+G含量宜在50%左右;引物内部和引物之间不应含有互补序列;引物的碱基顺序与非扩增区域的同源性应小于70%;引物的3’末端与模板DNA一定要配对,但末端没有严格的限制,故引物设计时可在5’末端加上限制性内切酶位点和/或启动密码ATG等;引物合成后必须纯化以去除合成产物中的不完整序列、脱嘌呤产物、碱基修饰链等“杂质”;引物的终浓度一般为0.2~0.5μmol/L,过低会影响反应产量,过高会增加引物二聚或错配的几率。

2.TaqDNA聚合酶具有5’→3’聚合酶活性和5’→3’外切酶活性,但无3’-5’外切酶活性,因此对单核苷酸的错配无校正功能,发生碱基错配的几率为2.1×10-4左右。然而TaqDNA聚合酶的优势在于反应产量高于其他DNA聚合酶。Stratagene推出的PfuDNA聚合酶一直是研究人员心目中最好的高保真酶,而PfuDNA聚合酶经基因工程改造后,新创出的PfuUltra具有更佳的校验活力。数据显示PfuUltraTM高保真DNA聚合酶的平均错配率为PfuDNA聚合酶的1/3,为TaqDNA聚合酶的1/18,是目前保真度最高的PCR酶(保真度=1/错误率)(数据来源:美国冷泉港实验室)。

3.Mg2+浓度也是影响反应效率和特异性的重要因素之一。TaqDNA聚合酶对Mg2+浓度非常敏感,Mg2+可与模板DNA、引物及dNTP等的磷酸根结合,不同反应体系中应适当调整MgCl2的浓度,一般以比dNTP总浓度高出0.5~1.0mmol/L为宜,Mg2+过量能增加非特异扩增。

4.dNTP的浓度过高会增加碱基的错误掺入率,使反应特异性下降;过低则会导致反应速度下降。使用时4种dNTP必须以等当量浓度配制,均衡的dNTP有利于减少错配误差和提高使用效率。

5.温度循环参数中应特别注意复性温度,它决定引物与模板的特异性结合。退火复性温度可根据引物的长度,通过Tm=4(G+C)+2(A+T)计算得到。在Tm允许的范围内,选择较高的退火温度可大大减少引物与模板之间的非特异结合。

6.减低污染的常规措施:①将PCR试剂、PCR产物及其他分子生物学试剂分开放置;②应保持样品制备、PCR反应液配制与PCR产物分析三个工作区的独立性;③使用阳性和阴性对照;④使用最高质量的水配制PCR实验的所有反应试剂;⑤配制好的PCR反应试剂应分成小包装储存,每个包装仅用于单次实验;⑥制备样品、配制试剂及反应液时必须戴手套;⑦实验前一定要认真清洁加样器等。

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